Перекрестный метод определения группы крови: последовательность действий

Определение группы крови перекрестным способом, как правило, дает более точный результат, чем простой анализ цоликлонами и позволяет не только более точно установить антигенный состав эритроцитов, но и выявить антиэритроцитарные антитела, если они присутствуют в сыворотке исследуемой крови. Перекрестный метод определения группы крови https://sangvitest.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi/ основан на совместном применении как стандартных сывороток (или эритроцитарных диагностикумов-цоликлонов анти-A, анти-B и анти-AB), так и стандартных эритроцитов (групп 0(I), A(II), B(III)).

Кроме указанных реагентов для исследования необходим планшет, песочные часы, пипетки Пастера, шесть стеклянных палочек. Выполняющий исследование работник должен обязательно использовать средства индивидуальной защиты (носить очки, медицинские перчатки, маску и халат), а любые образцы крови следует рассматривать как патогенно-опасные.

Порядок выполнения исследования:

1) планшет маркируется уникальным образом, в зашифрованном виде на него наносится информация о пациенте: ФИО, дата анализа, дата забора пробы;

2) после маркировки на планшете размечается шесть мест, подписанных в два ряда следующим образом: верхний ряд - анти-A, анти-B, анти-AB, нижний ряд - 0, A, B;

3) анализируемый образец крови отстаивается 30 минут при комнатной температуре, после чего сыворотка крови отделяется от осевших в осадок эритроцитов пипеткой Пастера;

4) в верхнем ряду, согласно обозначениям, на планшет помещают по одной капле соответствующих эритроцитарных диагностикумов (цоликлонов или стандартных сывороток);

5) в нижнем ряду, также согласно обозначениям, на планшет наносятся стандартные эритроциты (также по одной капле);

6) пипеткой Пастера эритроциты исследуемой крови наносятся на планшет рядом с каждой каплей цоликлонов, другой пипеткой Пастера сыворотка исследуемой крови наносится рядом с каждой каплей стандартных эритроцитов;

7) используя каждый раз новую стеклянную палочку, производится перемешивание капель реагентов с каплями эритроцитов и сыворотки, всего следует произвести шесть перемешиваний;

8) покачивая планшет, в течение 5 минут ведется наблюдение за поведением смесей.

Интерпретация результатов исследования:

• для образца крови группы 0(I) агглютинация (слипание эритроцитов в хорошо различимые глобулы, сгустки или хлопья) не наблюдается ни с одним из цоликлонов, но происходит при смешении сыворотки с эритроцитами групп A и B;
• для образца крови группы A(II) агглютинация эритроцитов происходит с цоликлонами анти-A и анти-AB, агглютинации сыворотки происходит с эритроцитами группы B;
• для образца крови группы B(III) агглютинация эритроцитов происходит с цоликлонами анти-B и анти-AB, агглютинации сыворотки происходит с эритроцитами группы A;
• для образца крови группы AB(IV) агглютинация эритроцитов происходит со всеми цоликлонами или стандартными сыворотками, агглютинации сыворотки со стандартными эритроцитами всех групп не наблюдается.

Для последнего случая следует провести исследование на исключение неспецифичной агглютинации, для этого исследуемые эритроциты смешиваются с физраствором, смесь должна оставаться гомогенной без сгустков или хлопьев.